案例分享七如何快速诊断面肩肱型肌 - 肌营养不良

TUhjnbcbe - 2021/2/27 18:30:00

白癞风的治愈率 https://m-mip.39.net/news/mipso_7007786.html
面肩肱型肌营养不良症（OMIM#；FacioscapulohumeralMuscularDystroph，FSHD）是一种高发病率的神经肌肉疾病，通常在两万人左右中会出现一名患者。核心病症为骨骼肌进行性无力和萎缩，受累部位主要是面部(面)、肩带(肩)和上臂(肱)。该病为常染色体显性遗传疾病，大部分病例属于家族遗传，三分之一左右的病人表现为新发突变。发病年龄主要在10-20岁区间，20岁的外显率大于95%，男性发病率为95%，女性发病率则为69%；一旦发病致残率高，迄今为止临床上的治疗方案都收效甚微。致病机制?????FSHD分为FSHD1型（~95%）和FSHD2型（~5%）：lFSHD1型中，染色体4q35区域上一个被称为D4Z4的3.3kb重复单元发生数量缺失，正常人一般有11-个重复单元的D4Z4，但是患者只有10个或更少的重复，同时当D4Z4最后重复单元远端存在一个polyA结构（4qA单体型，无此结构为不致病的4qB单体型）时，位于D4Z4的DUX4蛋白在肌肉细胞中表达失衡，造成肌纤维坏死，而且重复单元片段越小，发病年龄越早，病情越严重。lFSHD2型中，患者的18号染色体上SMCHD1基因突变使得染色体4q35的D4Z4区域甲基化程度有所下降，再加上polyA结构的4q35，DUX4在肌肉细胞中异常表达。l目前还有很少部分的病例未能追踪到致病机制，尚属于活跃的科研领域。图1目前FSHD1型的遗传学诊断有SouthernBlot和分子梳方法。尽管SouthernBlot是FSHD1检测的“金标准”，但它只可以检测到D4Z4重复单元的长度，不能确定具体数目。Bionano光学图谱技术的读长在bp以上，该技术利用切刻酶对DNA双链分子中的单链特异性序列进行识别酶切并标记荧光，然后高分辨率荧光成像全基因组酶切位点并得到数据分析结果，提供了对FSHD的准确分子诊断，得出的单体型分析与金标准SouthernBlot结果一致[1-2]。案例分享[3]

图2

临床信息28岁男性，面部肌无力，翼状肩胛且近端肌群无力。睡觉时眼睛微睁，无法鼓腮或吹口哨。母亲和姐姐都有类似肌肉症状。三人均通过Southernblot诊断为FSHD1型，都在4号染色体上识别到一个21kb的4qA型EcoRI片段。现对该男子、男子母亲、男子妻子及腹中胎儿（17周）进行FSHD1型的家系分析以进行产前诊断。检测结果Bionano光学图谱技术图3先证者（父亲）和胎儿的Bionano光学图谱结果在该家系检查中，Bionano单分子光学图谱技术的检测结果显示，先证者（胎儿父亲）染色体4q35区域存在重复单元数目缺失，两个等位基因分别存在4个D4Z4和19个D4Z4重复，都为4qA变体结构（图3A和图3B）。即目标区域单体型分别为4（4qA）和19（4qA），其中单体型4repeat;4qA是致病原因。胎儿染色体4q35区域也存在重复单元缺失（图3C和图3D），目标区域单体型分别为4（4qA）和30（4qA），其中致病的4（4qA）与其患病父亲的致病序列相似，意味着胎儿可能为FSHD1型阳性。核型定位图4II-2:胎儿父亲；II-3:胎儿母亲；III-2:胎儿；I-2:胎儿祖母应用染色体核型定位联合SNP-array技术分析染色体4q35.2区域（图4），先证者的DUX4等位基因的单体型为P1和P2，胎儿母亲的正常单体型为M1和M2。蓝色条形图为FSHD1型的致病序列。4q35.2区域没有发生重组。FSHD1型为常染色体显性遗传病，胎儿显然遗传了病原性染色体片段P1，因此胎儿极有可能受到FSHD1型的影响。使用胎儿羊水细胞进行Bionano光学图谱的结果与核型定位连锁分析所获得的结果一致。总结本研究结合了Bionano光学图谱和核型定位的方法，可以快速、准确地对FSHD1家族进行产前诊断。核型定位可用于基因的连锁分析，从而对FSHD1型进行间接诊断。Bionano光学图谱结果与先证者的SouthernBlot结果相比，可正确区分4q35与10q26同源序列（图3E和图3F），精确计算D4Z4重复单元数目，明确识别4qA、4qB变体结构，准确检出嵌合体类型，精准检测FSHD致病基因。此外，Bioano光学图谱技术还可以检测染色体的缺失、重复和倒位。两种方法结合能显著提高FSHD1型的诊断率和正确率。

参考文献

[1]DaiY,LiP,WangZ,etal.Single‐moleculeopticalmappingenablesquantitativemeasurementofD4Z4repeatsinfacioscapulohumeralmusculardystrophy(FSHD).JMedGenet.;jmedgenet--.

[2]ZhangQ,XuX,DingL,etal.Clinicalapplicationofsingle-moleculeopticalmappingtoamultigenerationFSHD1pedigree.Moleculargeneticsgenomicmedicine..Mar;7(3):e.

[3]ZhengY,KongL,XuH,etal.RapidprenataldiagnosisofFacioscapulohumeralMuscularDystrophy1by